FISH test

Z FISH test je mikroskopický chromozómový test pri prenatálnej a karcinómovej diagnostike rakoviny prsníka, rakoviny žalúdka a chronickej lymfocytovej leukémie. Test, ktorého výsledok je k dispozícii do 1 až 2 dní, môže primárne detegovať chromozomálne abnormality, ktoré je možné vysledovať späť k zmenenej množine chromozómov v určitých chromozómoch. Test sa vykonáva iba ako sprievodný alebo predbežný test na podrobnú analýzu chromozómov, ktorých výsledky sú k dispozícii iba 2 až 3 týždne po odstránení buniek.

Čo je test FISH?

Test FISH (Fluorescenčná in situ hybridizácia) v prenatálnej diagnostike umožňuje vyvodiť závery o zmenenej skupine chromozómov pre určité chromozómy. Na vykonanie testu FISH je potrebných najmenej 50 nekultivovaných plodových buniek (amniónové bunky), ktoré boli odobraté z plodovej vody (približne 2 - 3 ml). Alternatívnou metódou na získanie vhodných buniek je odber choriových klkov, pri ktorých sa bunky odoberajú z oblasti pripevnenia pupočníka biopsiou.

Špeciálny postup umožňuje, aby sa jednotlivé vlákna chromozómov 13, 18, 21 a chromozómy X a Y navzájom odlíšili fluorescenčnými farbami, takže možnú trizómiu možno identifikovať prítomnosťou troch namiesto dvoch homológnych vlákien chromozómu. , Pri rakovine žalúdka a prsníka sa môže pomocou testu FISH skontrolovať, či nádor má viac ako dve kópie génu HER2 / neu (receptor ľudského rastového faktora epidermálneho faktora), čo má následky na druh chemoterapie. V prípade chronickej lymfocytovej leukémie sa najčastejšie zmeny chromozómov v určitých génoch dajú zistiť pomocou niekoľkých FISH testovacích analýz vo vzorkách z kostnej drene a periférnej krvi, čo má tiež vplyv na terapiu.

Funkcia, účinok a ciele

Chromozómy v izolovaných bunkových jadrách sa vyrábajú tak, aby rozdelili svoju štruktúru dvojitej špirály špeciálnym chemickým ošetrením alebo pôsobením tepla, a chromozómovo špecifické DNA sondy s príslušnou komplementárnou sekvenciou DNA sa pripájajú k „ich“ špecifickým chromozómom. Sondy DNA sú označené rôznymi farebnými fluorescenčnými farbami, takže je možné rozlíšiť označené chromozómy pomocou špeciálneho softvéru a spočítať automatizovaným spôsobom.

Sú známe z. B. Trizómy, v ktorých sú tri chromozómy namiesto jedného chromozómu tri, Sú známe aj takzvané monozómy, v ktorých je iba jeden reťazec chromozómu X a tri alebo štyri homológne vlákna všetkých chromozómov. Najdôležitejšie chromozomálne zmeny, ktoré sa dajú zistiť pri teste FISH pri prenatálnej diagnostike, sú syndróm Ullricha Turnera (monozómia X), syndróm trojitého X (trizómia alebo polysomyómia X), Klinefelterov syndróm, v ktorých vo všetkých alebo niektoré somatické bunky u chlapcov majú ďalší X chromozóm (XXY namiesto XY), Downov syndróm (trizómia 21), Edwardsov syndróm (trizómia 18) a Patauov syndróm (trizómia 13).

Monozómia X, v ktorej dievčatá majú iba jeden chromozóm X, je zvyčajne fatálna, čo znamená, že asi v 98% prípadov vedie k potratu počas prvých troch mesiacov tehotenstva. V prípade, že sa tak narodí, dievčatá majú normálnu dĺžku života, majú priemernú inteligenciu, ale často trpia množstvom malformácií vnútorných orgánov a sú zvyčajne sterilné. Syndróm trojitého X s chromozómovou súpravou XXX) postihuje iba dievčatá. Je možné normálne tehotenstvo a pôrod.

Väčšina vysokých žien s trojitým chromozómom X môže normálne žiť a zvyčajne nevykazujú žiadne fyzické abnormality. Problémy s učením však nie sú neobvyklé a vyskytujú sa problémy s jemnými motorickými schopnosťami. Klinefelterov syndróm, ktorý môže ovplyvniť iba chlapcov a mužov, je charakterizovaný ďalším chromozómom X, ktorý je prítomný vo všetkých bunkách tela alebo iba čiastočne.Fyzikálne vlastnosti sú nadpriemerne vysoké s neobvykle dlhými rukami a nohami. Klinefelterov syndróm zvyčajne vedie k zníženému rastu semenníkov so zníženým uvoľňovaním testosterónu.

Downov syndróm, ktorý je synonymom trizómie 21, je väčšinou spojený s určitými fyzikálnymi charakteristikami a kognitívnymi poruchami. Existujú rôzne formy trizómie 21, z ktorých približne 95% prípadov prevláda tzv. Voľná ​​trizómia 21. Trizómia 18 (Edwardsov syndróm) vo väčšine prípadov spôsobuje potrat, je spojená s rôznymi fyzickými vlastnosťami a dĺžka života je len pár dní. Trizómia 13 (Pätauov syndróm) sa tiež vyznačuje veľkým počtom fyzických znakov a nežiaducim vývojom, ktoré často vedú k potratom alebo mŕtvym narodeniam. Priemerná dĺžka života detí v termíne je iba niekoľko rokov.

Cieľom prenatálneho testu FISH je odhaliť známe chromozomálne abnormality v počiatočnom štádiu, aby rodičom ponúkli alternatívu legálneho potratu, ktorý dieťa dovezie. Pri rakovine prsníka a pečene je možné pomocou FISH testu skontrolovať na karcinómy zvýšený počet génov HER2 / neu. V pozitívnom prípade je zvýšená tvorba receptorov rastových faktorov, ktoré reagujú na určité chemoterapie. Sú dostupné aj testy FISH na detekciu špecifických genetických abnormalít pri chronickej lymfocytovej leukémii (CLL), ktoré zlepšujú zloženie účinných chemoterapeutických látok.

Riziká, vedľajšie účinky a nebezpečenstvá

Samotný test FISH nie je spojený so žiadnymi rizikami ani nebezpečenstvami. Iba extrakcia buniek, ktoré sa majú vyšetriť biopsiou alebo vzorkovaním plodovej vody (amniocentéza), je spojená s malým rizikom infekcie v dôsledku ich invazívneho charakteru. Zvláštnosťou je, že test FISH môže odhaliť niektoré špecifické chromozomálne defekty, nie je však isté, či v prípade negatívneho výsledku neexistujú chromozómové aberácie, pretože pomocou testu FISH sa nedajú zistiť všetky anomálie. V prípade pozitívneho výsledku testu by sa mali vykonať ďalšie diagnostické postupy s cieľom potvrdiť výsledok alebo ho zamietnuť ako nepravdivé.